ANTIBIOGRAMAS COMPLETO

Antibiograma: Proceso y Procedimientos

Introducción al antibiograma

• El antibiograma permite identificar los antibióticos a los que una bacteria es sensible o resistente, facilitando el tratamiento adecuado.

Preparación de la muestra

• Se toman de tres a cinco colonias con un hisopo y se introducen en solución fisiológica. Es importante evitar el exceso de líquido al extraer el hisopo.

• La mezcla se puede realizar manualmente o utilizando un vortex para obtener una mejor homogeneidad.

Lectura y ajuste del inóculo

• Se mide la densidad óptica hasta alcanzar valores entre 0.08 y 0.1; si está por encima, se diluye más la muestra.

• Si la lectura es baja (por ejemplo, 0.068), se deben añadir más colonias para ajustar el inóculo.

Siembra en medios de cultivo

• Una vez ajustado el inóculo, se siembra en placas de Petri en tres direcciones para asegurar una distribución uniforme de las bacterias.

• La altura del medio debe ser exacta (4 mm); alturas incorrectas pueden dar lugar a falsos resultados de resistencia o sensibilidad.

Duplicación y preparación final

• Generalmente, se realizan dos siembras por duplicado: una para buscar mecanismos de resistencia y otra para opciones alternativas de antibióticos.

• Las cajas deben atemperarse antes de sembrar; tanto las cajas como los discos antibióticos deben estar fuera del refrigerador durante al menos dos horas.

Colocación de discos antibióticos

• Los discos se colocan con cuidado, manteniendo distancias específicas entre ellos (1.5 cm desde la pared hacia el centro y 2.5 a 3 cm entre discos).

Finalización del procedimiento

• Después de colocar los discos, las placas van a la estufa; es crucial ejercer presión ligera sobre los discos para asegurar su adherencia.

Alternativa en la preparación del inóculo

• Se puede usar un asa bacteriológica para preparar el inóculo; esto evita problemas con fibras del hisopo que podrían interferir con las lecturas.

Calibración y lectura final

• Antes de leer el espectro, es necesario calibrarlo a cero usando solución fisiológica como blanco.

Proceso de Siembra y Preparación de Antibióticos

Preparación del Inóculo

• Se acostumbra a observar la turbidez con el tiempo, facilitando la mezcla. Se lee un valor de 0.094, indicando que está listo para la siembra.

• Se utiliza un hisopo para sembrar en tres direcciones diferentes, asegurando que las condiciones sean uniformes (altura de 4 mm).

• Es crucial evitar falsas resistencias y sensibilidades al antibiótico; se debe medir adecuadamente.

Técnica de Siembra

• Si no se llega al final, se puede dar vuelta y continuar desde donde se dejó. La siembra debe ser rápida y sin espacios visibles.

• Después de sembrar, se descarta el hisopo y se colocan los antibióticos correspondientes con pinzas.

Manejo de Antibióticos

• Al colocar los discos de antibióticos, es importante ejercer presión adecuada y evitar mezclar concentraciones entre discos.

• No es necesario medir distancias exactas entre discos; deben estar distribuidos uniformemente en la caja.

Identificación de Antibióticos

• Se presentan varios antibióticos como astromicina (atm), piperacilina (pipa), cefotaxima (7x), amoxicilina más ácido clavulánico (amc), entre otros.

• Los nombres abreviados son importantes para identificar mecanismos de resistencia durante el antibiograma.

Lectura del Antibiograma

• Al día siguiente, se realiza una lectura para determinar qué antibióticos son efectivos o no para el paciente.

• Los resultados permiten clasificar los antibióticos en sensibles, intermedios o resistentes según el tamaño del halo alrededor de los discos.

Mecanismos de Resistencia

• Para detectar resistencia tipo BLEE, se colocan tres discos específicos junto a un inhibidor beta-lactamasa; la deformación indica resistencia.

• Un resultado positivo significa que la bacteria es resistente a penicilinas y cefalosporinas; esto debe comunicarse al médico.

Evaluación Adicional

• El mecanismo AMD también requiere pruebas específicas colocando discos estratégicamente; un achatamiento indica resistencia a múltiples clases de antibióticos.

Proceso de Lectura y Análisis del Antibiograma

Introducción al Antibiograma

• Se puede colocar todos los antibióticos en una misma caja para buscar mecanismos de resistencia simultáneamente. La lectura del antibiograma se realiza 24 horas después.

• En el análisis, se colocan antibióticos específicos en cajas para ofrecer opciones al médico, permitiendo evaluar la resistencia.

Métodos de Medición

• La lectura del diámetro del halo alrededor del disco se mide con una regla, asegurando que la medición pase por el centro del disco.

• Se menciona un manual de CLS con modificaciones recientes; es importante seguir las guías actualizadas para la interpretación correcta.

Clasificación de Bacterias

• Se utilizan discos específicos para diferentes tipos de bacterias, como Enterobacteriaceae y Pseudomonas aeruginosa, lo que permite determinar sensibilidad o resistencia a los antibióticos.

• Para el caso específico de Enterobacteriaceae, se busca información sobre la sensibilidad a foxy team (cefoxitina).

Interpretación de Resultados

• Al revisar los resultados, se determina si la bacteria es sensible o resistente basándose en el tamaño del halo medido; un valor mayor a 18 indica sensibilidad.

• Los resultados deben ser organizados en una tabla que clasifique los antibióticos como sensibles, intermedios o resistentes.

Documentación y Reporte

• Se debe anotar cada resultado junto con su clasificación y cualquier mecanismo de resistencia identificado. Por ejemplo, si Escherichia coli produce un mecanismo específico.