21 SIEMBRA EN MEDIO LIQUIDO

Siembra en Medio Líquido

Resumen de la Sección: Esta sección presenta la técnica de siembra en medio líquido, que se utiliza para preparar cultivos microbianos, enriquecer un inoculante, homogeneizarlo o cuantificarlo.

Procedimiento con Asa Bacteriológica

• Para transferir el inóculo con el asa bacteriológica, primero debemos esterilizarla y dejarla enfriar dentro de una zona aséptica.

• Tomamos el tubo que contiene la muestra líquida y lo destapamos cerca del mechero. Introducimos el asa hasta sumergirla en la muestra y la sacamos verticalmente evitando tocar las paredes del tubo.

• Manteniendo el asa en el área séptica, tapamos el tubo.

• En una zona séptica, destapamos el matraz donde colocaremos el inóculo. Flameamos la boca e introducimos el asa con el inóculo en el medio agitándola suavemente.

• Por último, sacamos y flameamos nuevamente la boca del matraz antes de taparlo.

Procedimiento con Hisopo

• Para transferir el inóculo con un hisopo estéril, sujetamos el tubo que contiene la muestra y lo destapamos asépticamente. Introducimos y agitamos suavemente el hisopo dentro del medio.

• Quitamos el exceso de líquido presionando contra la pared interna del tubo y tapamos el recipiente. Colocamos el hisopo en un contenedor de residuos biológicos infecciosos para su posterior esterilización.

Procedimiento con Pipeta

• Antes de tomar la muestra, preparamos una pipeta estéril con un bulbo o propipeta cerca del mechero.

• En condiciones asépticas, abrimos el recipiente que contiene la muestra y succionamos el volumen deseado con la pipeta. Flameamos la boca del recipiente y lo tapamos.

• Sujetamos el recipiente donde colocaremos el inóculo, lo abrimos asépticamente e introducimos la pipeta para liberar el inóculo en el medio.

• Por último, planeamos la boca del recipiente y lo tapamos. Colocamos la pipeta en un recipiente con desinfectante.

Transferencia con Pipeta Automática

• La transferencia con pipeta automática es similar a las anteriores, pero debemos mantener estéril solo la punta intercambiable que entrará en contacto con la muestra y el medio de cultivo a inocular.

Puntos Críticos y Organización

• Es importante mantener todo el material dentro de una zona aséptica durante todo momento.

• Evitar tocar con las manos la punta de las pipetas serológicas o pasteur intercambiables.

• Sostener firmemente las pipetas para evitar oscilaciones fuera de la zona aséptica o contacto con material no estéril.

• Organizar previamente todo el material necesario, incluyendo un recipiente con solución desinfectante para el desecho de las pipetas o puntas.